尊龙凯时提供的本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。以下是人白三烯D4 (LTD4) ELISA试剂盒的使用说明,包括检测原理和样品处理方法。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,将标本、标准品及HRP标记的检测抗体逐步加入预先涂覆了adropin (AD) 抗体的微孔中。经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB显色。在过氧化物酶的催化下,TMB会转化为蓝色,随后在酸性环境中变为最终的黄色。样品中adropin (AD) 的浓度与显色深浅呈正相关。通过在450nm波长下测定样品的吸光度(OD值),可以计算出样品的浓度。
样品收集、处理及保存方法
尊龙凯时建议用户按照以下步骤正确处理样品:
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管。在操作过程中,避免任何细胞刺激,血液收集后,3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,3000转离心30分钟后取上清液。
- 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水,进行捣碎处理。然后在3000转离心10分钟后取上清液。
- 保存:如未能及时检测,务必将样品按单次使用量分装并冷冻保存于-20℃,避免反复冻融。解冻时应在室温下进行,并确保样品充分均匀解冻。
操作注意事项
试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。对于试剂的准备,20×洗涤缓冲液需要按照1:20的比例稀释,具体为1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。洗板的操作方法也要按照说明执行。
结果判断
在Excel表格中,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制线性回归标准曲线。根据曲线方程可算出各样本浓度值。
请注意,本试剂盒的性能已在多项实验中验证,但尊龙凯时不对其适用性或结果负责。用户需自行判断实验结果。