抗体药物，如单克隆抗体、双抗体、抗体片段、抗体偶联药物以及抗体融合蛋白等，因其强大的靶向性、高特异性及低毒副作用，被广泛应用于自身免疫疾病和抗肿瘤治疗领域。面对日益增长的市场需求，开发新型抗体药物及优化下游生产工艺的重要性愈发凸显，这在经济和社会层面都具有深远的意义。

抗体的纯化过程极为复杂，需要结合多种分离手段来设计合理的纯化流程，以高效获得高质量的产品。抗体的下游工艺一般包括以下几个步骤：1. 细胞澄清收获，通过离心和过滤等方法去除细胞及其碎片；2. 亲和捕获，采用Protein A亲和层析技术捕获抗体；3. 低pH孵育以去除病毒；4. 中间纯化与精纯，去除产品及过程相关的杂质；5. 纳滤与超滤，去除病毒以获取最终抗体产品。

该步骤的目标是从复杂的发酵液中高效捕获目标抗体。Protein A冠以金黄色葡萄球菌特有的亲和性，能特异性结合IgG FC片段，通常能够在一步纯化中达到90%以上的纯度，尤其适用于人源抗体（非IgG3）及FC融合蛋白，因此是捕获抗体蛋白中最有效的层析手段。通过低pH洗脱与孵育连接，病毒能有效减少至7-8个数量级，后续仅需1-2步纯化便可完成抗体的全流程纯化。选择Protein A层析介质时，考虑的主要因素包括载量、流速、耐碱性、使用寿命以及Protein A残留量。

为了确保安全纯度，捕获后的抗体样品应进一步去除宿主蛋白、宿主DNA、聚集体、抗体片段、内毒素和脱落的Protein A等相关杂质。离子交换层析与疏水层析是实现此目的的常用手段。离子交换层析基于抗体与杂质的带电性差异，是抗体纯化过程中的关键步骤。阴离子交换层析通常采用流穿模式去除内毒素、病毒等杂质，而阳离子交换层析则一般选择结合洗脱模式，在酸性条件下，大多数抗体结合在介质上，通过增加洗脱缓冲液中的盐浓度或提高pH进行洗脱，除杂效果显著。特别是具有高分辨率与高选择性的阳离子交换层析介质，如MegaPolyBXS、DiamondCD-S及DiamondSPMustang等，能够有效去除聚集体、宿主蛋白HCP以及Protein A。

疏水层析与离子交换层析相辅相成，通常抗体的疏水性强于大部分杂质，主要用于去除抗体聚集体和HCP。在疏水层析中，介质的疏水性对回收率和杂质去除效果有显著影响，因此选择合适的配基是关键。常见的疏水作用层析配基的强弱顺序为：Butyl-S < Butyl < Octyl < Phenyl。此外，诸如DiamondMMC与DiamondMIX-A等兼具疏水作用与离子交换作用的多模式填料正日益受到重视，这种新型混合模式介质对宿主蛋白、脱落的配基及多聚体等杂质的去除能力十分高效，能够有效简化纯化步骤并提高纯化效率。

随着抗体药物在临床治疗中的广泛应用，下游纯化工艺的开发显得愈加重要。灵活运用各种层析模式并正确选择层析填料，将为抗体纯化提供更经济高效的工艺路线。作为中国较早具备大规模生产分离纯化介质能力的企业，尊龙凯时自2008年成立以来，专注于为分离纯化提供高质量的层析介质，在行业内获得了良好的声誉。我们提供各种分离纯化介质、预装柱、实验室与工业生产级空柱及微载体，同时还提供分离纯化工艺开发服务及填料定制，助力生物医药行业的持续进步。