在分子生物学领域,RNA提取是至关重要的基础步骤,其提取效率和纯度直接关系到后续实验的成败。尊龙凯时推出的Trizol试剂是一种高效、可靠的核酸提取试剂,专为科研人员提供专业解决方案。
Trizol产品特点
Trizol试剂采用经典的酸性酚-氯仿分离法,能够从细胞、组织、植物等多种样本中快速提取高纯度的RNA,满足多种实验需求,节省时间,提高效率。
提取出的RNA具备极高的纯度和完整性,A260/280值通常在1.8到2.0之间,完全符合分子生物学实验的严格要求。
该试剂适用于多种样本类型,包括细胞、组织、细菌、酵母和病毒等。提取的核酸可直接用于Northern blot、点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RNase保护实验、cDNA克隆及RT-PCR等;同时也适用于基因表达芯片分析、高通量测序等对RNA质量要求高的实验,确保结果的准确性和可靠性。
所需试剂和耗材
在进行RNA提取时,建议使用以下试剂和耗材:
试剂:
- Trizol试剂 (abs60154) - 裂解样本
- 氯仿 - 离心后分离上层水相(含RNA)
- 异丙醇 - 沉淀RNA
- 75%乙醇 - 洗涤RNA沉淀
- DEPC-ddH2O (abs9259) - 溶解RNA
耗材:
- abs7119 - 15 mL 无菌无酶离心管
- abs7118 - 50 mL 无菌无酶离心管
- abs7071 - 10 uL 无菌无酶滤芯吸头
- abs7074 - 200 uL 无菌无酶滤芯吸头
- abs7077 - 1000 uL 无菌无酶加长吸头
操作步骤
对于组织样本,每50-100mg组织使用1mL Trizol。将动物或植物组织切块后,在液氮中研磨或使用匀浆器处理。将研磨后的组织快速转入含1mL Trizol的离心管中,迅速混匀后置于冰上,待所有样品处理完成。裂解产物应呈澄清的粘稠液体。如果处理的是富含蛋白质或脂肪的组织,可能需要进行离心以去除不溶物质。
对于细胞样本,贴壁细胞需吸尽培养液后加入Trizol进行裂解,悬浮细胞需离心收集后同样加入Trizol进行裂解。
将裂解产物静置5分钟后加入氯仿,剧烈振荡,再放置2-3分钟。离心后可观察到三层分离,吸取含RNA的上层水相至新离心管中。
加入异丙醇使RNA沉淀,然后用75%乙醇洗涤沉淀,干燥后用DEPC-ddH2O或TE缓冲液溶解RNA。最后,通过电泳及紫外分光光度计检测RNA的浓度、纯度和完整性。所得RNA应立即使用或在-80℃保存以避免反复冻融。
凭借几步简便的操作,科研人员即可获得高质量的RNA,确保实验的顺利进行。除了Trizol (abs60154)之外,尊龙凯时还提供包括RNA提取全流程试剂的Trizol(总RNA抽提试剂盒)(abs9331)。
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